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掃描電鏡生物樣品制備:從冷凍切片到金屬涂覆的步驟

日期:2023-08-23

掃描電子顯微鏡(SEM)在生物樣品研究中廣泛應用,但為了在SEM中觀察生物樣品,需要對樣品進行適當?shù)闹苽洹R韵率菑睦鋬銮衅浇饘偻扛驳囊话悴襟E,以便將生物樣品制備成SEM觀察所需的樣品:

固定樣品: 首先,生物樣品需要進行固定以保持其結構和形態(tài)。常用的固定方法包括使用蛋白質(zhì)交聯(lián)劑(如戊二醛)或化學固定劑。

冷凍切片: 將固定的生物樣品切割成薄片,通常采用超薄切片技術。這可以通過冷凍切片機將樣品冷凍并切成非常薄的切片,以保留其內(nèi)部結構。

脫水: 從冷凍切片中去除水分,常用的方法是將樣品在低溫下暴露在低壓下,以使水分逐漸升華,而不是通過液體蒸發(fā)。

金屬涂覆: 生物樣品通常不導電,而SEM需要樣品表面具有導電性。因此,在觀察之前,需要在樣品表面涂覆一層薄金屬層,通常使用金屬蒸發(fā)或濺射技術。

金屬蒸發(fā): 在真空條件下,將金屬(如金或鉑)加熱至其熔點,使其蒸發(fā)并沉積在樣品表面,形成一層薄金屬涂層。

金屬濺射: 使用離子束或電子束將金屬靶材濺射到樣品表面,也能產(chǎn)生薄金屬層。

觀察: 經(jīng)過金屬涂覆后,生物樣品已準備好在SEM中進行觀察。通過在SEM中照射樣品表面,收集反射電子或二次電子來生成顯微圖像。

這些步驟是一般的生物樣品制備過程,但需要根據(jù)實際情況進行微調(diào)和優(yōu)化。制備的關鍵是保持樣品的結構、形態(tài)和細節(jié),同時確保樣品表面具有適當?shù)膶щ娦?。在每個步驟中,控制實驗條件和儀器參數(shù)非常重要,以獲得高質(zhì)量的SEM圖像。

ZEM18臺式掃描電鏡

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以上就是澤攸科技小編分享的掃描電鏡生物樣品制備。更多掃描電鏡產(chǎn)品及價格請咨詢 


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作者:澤攸科技


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